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安捷倫液相色譜儀的規范操作
更新時間:2016-06-07   點擊次數:1379次

 
 
安捷倫液相色譜儀的規范操作 
  
1. 目的:明確安捷倫液相色譜儀的規范操作,確保數據的準確性。

2. 范圍:適用于安捷倫液相色譜儀。

3. 職責:檢驗人員對此負責。

4. 操作規程:

4.1 系統組成 
本系統由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進樣閥、柱溫箱、檢測器、化學工作站和電腦等組成。

4.2 準備 
4.2.1使用前應根據待檢樣品的檢驗方法準備所需的流動相,用合適的0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣20min。 
4.2.2 根據待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進出口位置應與流動相流向一致)和定量環。 
4.2.3 配制樣品和標準溶液(也可在平衡系統時配制),用合適的0.45μm濾膜過濾。 
4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常 
4.1 將待測樣品按要求前處理,準備HPLC 所需流動相,檢查線路是否連接完好,廢液瓶是否夠用等。

4.3開機: 
4.3.1 打開計算機,進入中文Windows XP畫面,并運行CAG Bootp Server程序。

4.3.2 打開 1200 LC 各模塊電源。 
4.3.3 待各模塊自檢完成后,雙擊[Instrument 1 Online]圖標,化學工作站自動與1200LC 
通訊,進入的工作站畫面如下所示。 
4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運行控制]畫面, 點擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄], [ 顯示狀態工具欄],[系統視圖],[樣品視圖],使其命令前有[√]標志,來調用所需的界面。 

4.3.5 把流動相放入溶劑瓶中。

4.3.6 打開沖洗閥。 

4.3.7 點擊[泵]圖標,點擊[設置泵…]選項,進入泵編輯畫面。

4.3.8 設流速:5ml/min,點擊[確定]。 
4.3.9 點擊[泵] 圖標,點擊[控制…]選項,選中[啟動],點擊[確定] ,則系統開始沖洗,直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續沖洗,直到所有要用通道無氣泡為止。 
4.3.10 點擊[泵] 圖標,點擊[控制…]選項,選中[關閉],點擊[確定]關泵, 關閉沖洗閥。 
4.3.11 點擊[泵]圖標,點擊 [設置泵…選項],設流速:1.0ml/min。 
4.3.12 點擊泵下面的瓶圖標,如下圖所示(以單元泵為例),輸入溶劑的實際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積,點擊[確定]。

4.4 數據采集方法編輯 
4.4.1開始編輯完整方法:從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項,如下圖所示選中除[數據分析 ]外的三項,點擊[確定],進入下一畫面。 4.4.2方法信息 
4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如:測試方法)。 4.4.2.2 點擊 [確定], 進入下一畫面。 4.4.3 泵參數設定 
4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min,在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓,以保護柱子。 
4.4.3.2 點擊[確定],進入下一畫面。

4.4.4 柱溫箱參數設定 
4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內輸入所需溫度,如:40度。并選中它,點擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側相同],使柱溫箱的溫度左右一致。

4.4.4.2 點擊[確定],進入下一畫面。 
4.4.5 檢測器參數設定:檢測波長:一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬:一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區域 。參比帶寬:至少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式,步長,范圍,閾值。選中所用的燈。

4.4.6 在[ 運行時選項表 ]中選中[ 數據采集],點擊[確定]。 

4.4.7 點擊[方法]菜單,選中[方法另存為…],輸入一方法名,如[測試],點擊[確定]。 
4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復10,選中[信號窗口2]。 
單擊[改變]鍵,即可彈出右側的[編輯信號圖譜]窗口,進而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項,如下圖所示,輸入操作者名稱,如[安裝工程師];在[數據文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數器]。區別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數據覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數器----[前綴]框中輸入前綴,在[計數器]框中輸入計數器的起始位,儀器會自動命名,如vwd數據0001,vwd數據0002……。 
4.4.10 點擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統開啟]。 
4.4.11 等儀器準備好,基線平穩,用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取適量。 
4.5 數據分析方法編輯: 
4.5.1 從[視圖]菜單中,點擊[數據分析]進入數據分析畫面。 
4.5.2 從[文件]菜單選擇[調用信號],選中您的數據文件名,如下圖所示。點擊[ 確定],則數據被調出。 
4.5.3做譜圖優化:從[圖形]菜單中選擇[信號選項],如下圖所示。從[范圍] 中選擇[滿量程] 或[自動量程] 及合適的時間范圍或選擇[自定義量程] 調整。反復進行,直到圖的比例合適為止。點擊[ 確定]。 4.6積分: 
4.6.1 從[積分]菜單中選擇[積分事件]選項,如下圖所示。選擇合適的[斜率靈敏度] 
,[峰寬],[zui小峰面積],[zui小峰高]。

 

 

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